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免疫沉淀實(shí)驗(yàn)
發(fā)布時間： 2021-01-13 點(diǎn)擊次數(shù)： 2808次一、服務(wù)介紹
免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）是指利用抗體與抗原間的特異性結(jié)合特性，將抗原（我們感興趣的靶蛋白）-抗體復(fù)合物從樣品中分離出來，達(dá)到初步分離純化靶蛋白的目的。之后，樣品可以再進(jìn)行Western blot 分析。
二、實(shí)驗(yàn)原理
免疫沉淀是利用抗原與抗體免疫反應(yīng)達(dá)到純化，定性檢測蛋白的目的，即在蛋白質(zhì)提取液中加入與抗原（靶蛋白質(zhì)）特異性結(jié)合的抗體，抗體與抗原結(jié)合后形成免疫復(fù)合物，再與蛋Protein A/G 或二抗偶聯(lián)的瓊脂糖珠子孵育，通過離心得到免疫復(fù)合物再經(jīng)過純化，洗脫后進(jìn)行SDS-PAGE及WB分析，從而實(shí)現(xiàn)純化目的蛋白質(zhì)、定性檢測抗原或抗體。
三、免疫沉淀實(shí)驗(yàn)流程：
1.樣品裂解
細(xì)胞培養(yǎng)物的裂解或組織裂解
2.裂解物預(yù)清除
3.免疫沉淀
4.SDS - PAGE 電泳。
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