一、單精子注射實驗技術(shù)定義與核心原理

單精子注射（ICSI） 是一種顯微操作輔助生殖技術(shù)，通過物理方式將單個精子直接注入成熟卵母細胞的胞質(zhì)內(nèi)，強制完成受精過程。其核心原理包括：

1. 繞過自然受精屏障：

• 規(guī)避精子獲能、頂體反應(yīng)及卵膜穿透等自然步驟，直接解決精子活力低下、形態(tài)異?；蚵涯讣毎ご┩刚系K等問題。

2. 精卵強制融合：

• 通過顯wei針機械刺激卵母細胞，激活鈣振蕩信號通路，啟動胚胎發(fā)育。

3. 遺傳物質(zhì)高效利用：

• 單精子即可完成受精，顯著節(jié)省珍貴遺傳資源（如瀕危物種精液、死亡個體冷凍樣本）。

生物學(xué)意義：ICSI不僅是受精失?。ㄈ缍嗑肼?、精子無能）的補救方案，更是研究受精機制與胚胎發(fā)育的關(guān)鍵實驗?zāi)Ｐ?/span>。

二、單精子注射實驗標準化操作流程（以馬為例）

1. 卵母細胞采集與成熟

2. 精子處理與注射

• 精子來源：新鮮精液、冷凍復(fù)蘇精液、附睪穿刺精子甚至死精（需化學(xué)激活）。

• 注射關(guān)鍵操作：

• 精子制動：顯微zhen機械損傷尾部，增強受精能力。

• 顯微注射：固定卵子→穿刺透明帶→注入精子（需<0.5 pL胞質(zhì)抽吸驗證）。
  

   

3. 胚胎培養(yǎng)與移植

• 體外培養(yǎng)：受精卵在KSOM/SOF培養(yǎng)基中培養(yǎng)至囊胚（約7–10天）。

• 移植策略：

• 手術(shù)移植：早期胚胎植入受體輸卵管（高妊娠率但侵入性強）。

• 非手術(shù)移植：囊胚期經(jīng)宮頸植入子宮（主流趨勢）。